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解讀|ELISA 法快速檢測食品中重金屬含量的研究進(jìn)展

更新時(shí)間:2018-01-08      點(diǎn)擊次數:1959

比重大于 4.5 的金屬被稱(chēng)為重金屬,如鉻(Cr)、鉛(Pb)、鎘(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、銅(Cu)等,它們往往在動(dòng)物和植物體內不斷積聚,再經(jīng)由食物鏈富集,zui后進(jìn)入人體并在人體內與蛋白質(zhì)及酶等發(fā)生強烈的相互作用,使它們失去活性,從而危害人體健康。我國食品中重金屬超標問(wèn)題也時(shí)有發(fā)生,水產(chǎn)品、海產(chǎn)品、水果、蔬菜以及糧食等均存在重金屬超標的現象。

 

目前,重金屬檢測已成為食品安全檢測的一項重要內容。傳統的重金屬檢測方法有很多,例如原子吸收分光光度法(AAS)、液相色譜法(HPLC)、原子熒光分光光度法(AFS)、電感藕合等離子體法(ICP)等。電感藕合等離子體法又分為電感藕合等離子質(zhì)譜法(ICP-MS)和電感藕合等離子原子發(fā)射光譜法(ICP-AES)。經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,傳統的重金屬檢測方法已日趨成熟,例如HPLC 靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、重復性好且可同時(shí)測定多種元素。但該方法檢測費用高,流動(dòng)相消耗大且多數有毒,并且可供使用的結合劑有限,給該方法帶來(lái)了很多的局限性。這些傳統的重金屬檢測方法均有各自的優(yōu)點(diǎn),也存在一些難以解決的問(wèn)題:如有的方法儀器設備昂貴、專(zhuān)業(yè)技術(shù)要求高、難以應用于現場(chǎng)實(shí)時(shí)快速檢測等。

 

自從酶聯(lián)免疫法(Enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)被Engvall 等建立以來(lái),廣泛用于食品、醫學(xué)檢測,近年來(lái)許多學(xué)者研究用于重金屬的檢測,與傳統檢測技術(shù)相比,有操作簡(jiǎn)便、特異性強、靈敏度高、適用于現場(chǎng)檢測等優(yōu)點(diǎn),因而 ELISA 法在重金屬的檢測中得以快速發(fā)展。

 

隨著(zhù)酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)在重金屬檢測上的快速發(fā)展,ELISA 試劑盒的應用解決了傳統檢測技術(shù)的一些弊端,現已成為了一種快速、簡(jiǎn)便和可靠的檢測手段。ELISA 檢測方法只能在液相環(huán)境中進(jìn)行,即只能檢測離子態(tài)重金屬,而金屬往往以結合態(tài)存在于樣品中,因此需要通過(guò)前處理使樣品中待測的金屬離子釋放到液相檢測環(huán)境中,同時(shí)還可除去干擾因子避免對后續檢測結果的影響。因此,建立一套快速、、環(huán)保且適用于ELISA 法檢測重金屬含量的樣品前處理的方法具有重要的意義。目前適用于ELISA 法快速檢測食品中重金屬含量的樣品前處理方法主要有:濕式消化法、微波消解法、浸提法等。

 

ELISA法檢測重金屬常用方法

1

間接競爭法

間接競爭法的原理是待檢測樣品中的競爭物和重金屬*抗原共同競爭結合單克隆抗體相同表位,通過(guò)酶標二抗孵育,底物顯色后可通過(guò)標準曲線(xiàn)得到待檢測樣品中的重金屬離子的濃度。該方法是zui早使用的免疫學(xué)檢測方法,該方法比較成熟和完善,也是目前應用zui多的方法。隨著(zhù)研究的深入,ELISA 法檢測重金屬樣品靈敏度已經(jīng)*可以達到傳統的技術(shù)的水平。

 

2

直接競爭法

直接競爭法的原理與間接競爭法類(lèi)似,相對于間接競爭法來(lái)說(shuō),無(wú)需加二抗,一方面降低了實(shí)驗成本、簡(jiǎn)化了操作步驟;另一方面其檢測靈敏度高、特異性強。但由于起步相對較晚,應用沒(méi)有間接競爭法普遍。Liu [38]等采用直接競爭ELISA法檢測農產(chǎn)品中Cd2+,IC50值為2.30μg/L,檢測限為0.2 μg/L,并表現出高特異性,并且結果與GFAAS法的檢測結果的符合率高達99%,加之其簡(jiǎn)便性和經(jīng)濟性,*適用于農產(chǎn)品中重金屬的檢測。

 

傳統重金屬檢測方法比較成熟,靈敏度高,但需要專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員以及儀器設備較大、較笨重且成本高。ELISA 法檢測重金屬存在檢測過(guò)程操作簡(jiǎn)便、特異性強、靈敏度高且適用于現場(chǎng)檢測等優(yōu)點(diǎn),是一種具有特異性強和靈敏度高的檢測方法。隨著(zhù)研究的深入,ELISA法檢測重金屬樣品也日臻成熟,靈敏度多已達到ng至pg級水平,加之ELISA法檢測重金屬的方便性,將在很多方面得到更廣泛的應用。

 

【參考文獻】

茍珍瓊,蘭洋,鄭韻,等. ELISA 法快速檢測食品中重金屬含量的研究進(jìn)展[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè),2017-9-19.

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